多克隆抗體定制
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服務(wù)特色
金開(kāi)瑞的多克隆抗體制備平臺(tái)，以抗體平臺(tái)為核心建立了一系列技術(shù)平臺(tái)和動(dòng)物養(yǎng)殖基地，可以提供包括兔、小鼠、大鼠、羊等多個(gè)系統(tǒng)的多克隆抗體制備服務(wù)，供您自由選擇屬于您的特殊需求!
服務(wù)介紹
????多克隆抗體的制備是一種通過(guò)免疫宿主動(dòng)物產(chǎn)生多個(gè)不同的抗體克隆的技術(shù)。它基于免疫系統(tǒng)的特性，通過(guò)免疫宿主動(dòng)物對(duì)特定抗原的免疫刺激，誘導(dǎo)免疫細(xì)胞產(chǎn)生多樣性的抗體，以應(yīng)對(duì)抗原的多樣性和復(fù)雜性。由于多克隆抗體具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域，經(jīng)常用作WB實(shí)驗(yàn)中的酶標(biāo)二抗和ELISA實(shí)驗(yàn)中的包被抗體。
????多克隆抗體存在于免疫動(dòng)物的血清中，可通過(guò)直接分離血清獲得。由于具有可識(shí)別多個(gè)表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域，經(jīng)常用作WB實(shí)驗(yàn)中的酶標(biāo)二抗和ELISA實(shí)驗(yàn)中的包被抗體。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
- 多樣性：多個(gè)抗體克隆，覆蓋多個(gè)抗原區(qū)域，提高抗原識(shí)別能力。
- 高特異性：精確識(shí)別目標(biāo)抗原，減少非特異結(jié)合。
- 高親和力：強(qiáng)烈結(jié)合目標(biāo)抗原，增強(qiáng)抗原-抗體作用。
- 靈活性：適用于多種應(yīng)用，滿足不同研究需求。
- 容錯(cuò)性：部分抗體失效時(shí)仍有其他克隆起作用，減少失敗風(fēng)險(xiǎn)。
- 成本效益：相對(duì)經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，一次實(shí)驗(yàn)可獲得多個(gè)抗體克隆。
服務(wù)流程
客戶提供
重組蛋白：至少2-3 mg，蛋白純度大于90%，濃度不低于0.5 mg/mL，蛋白分子量大于10kDa；
多肽：裸肽1 mg，偶聯(lián)KLH/BSA/OVA或其他載體蛋白3-4 mg，裸肽純度大于90%，序列長(zhǎng)度不少于10個(gè)AA；
病毒/細(xì)菌/膠條/天然蛋白等抗原類型請(qǐng)具體咨詢，另外也可選擇由金開(kāi)瑞制備抗原。
最終交付
- 免疫前抗血清1 mL；免疫后抗血清12 mL/只，親和純化的抗體10-15 mg
- 備注：若選擇抗原親和層析純化，可提供1-5 mg純化抗體；
- 鑒定報(bào)告，包括免疫原序列、SDS-PAGE電泳圖譜、表達(dá)克隆測(cè)序報(bào)告、效價(jià)檢測(cè)ELISA結(jié)果，并根據(jù)客戶需求，提供抗體驗(yàn)證結(jié)果，如WB、IHC、IP、IF等。
服務(wù)說(shuō)明
| 服務(wù)編號(hào) | 客戶提供 （抗原/信息） |
抗體純化方式 | 抗體類型 | 服務(wù)內(nèi)容 | 服務(wù)周期 |
| JKR-pb001 | 抗原 | ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原質(zhì)控，動(dòng)物免疫，ELISA/WB檢測(cè)， 采血，ProteinG/抗原親和純化，WB檢測(cè) |
8-10周 |
| JKR-pb002 | 基因序列 （蛋白） |
ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原分析及設(shè)計(jì)，全基因合成，表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建， 蛋白表達(dá)及純化，動(dòng)物免疫，ELISA/WB檢測(cè)， 采血，ProteinG/抗原親和純化，WB檢測(cè) |
20-24周 |
| JKR-pb003 | 基因序列 （多肽） |
ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
抗原分析及設(shè)計(jì)，多肽合成，載體偶聯(lián)， 偶聯(lián)物質(zhì)控，動(dòng)物免疫，ELISA/WB檢測(cè)， 采血，ProteinG/抗原親和純化 |
16-20周 |
| JKR-pb004 | 質(zhì)粒模板 | ProteinG/抗原親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
蛋白表達(dá)及純化，動(dòng)物免疫，ELISA/WB檢測(cè)， 采血，ProteinG/抗原親和純化，WB檢測(cè) |
16-20周 |
| JKR-pb005 | 小分子化合物 | ProteinA/G親和純化 | 小鼠、大鼠、羊、等多抗 |
半抗原偶聯(lián)載體，小分子偶聯(lián)物質(zhì)控，動(dòng)物免疫， ELISA檢測(cè)，采血，ProteinA/G親和純化 |
16-20周 |
| JKR-pb006 | 磷酸化/甲基化/乙?；刃揎椥畔?/span> | 抗原親和純化 | 修飾抗體 |
多肽合成（修飾/非修飾多肽），載體偶聯(lián)，動(dòng)物免疫， ELISA/WB檢測(cè)，采血，抗原親和純化（修飾非修飾多肽） |
24-28周 |
案例展示
在線課堂
常見(jiàn)問(wèn)題與解析 (Q&A)
多抗制備整個(gè)流程大致包括：（1）抗原制備；（2）動(dòng)物免疫；（3）血清采集與檢測(cè)；（4）多抗純化與保存。
分子量大于10kDa，B純度>85%，濃度不低于0.5mg/ml，最好1–5mg/ml之間的可溶性蛋白。不應(yīng)含有疊氮鈉、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物質(zhì)。甘油含量應(yīng)低于20%。質(zhì)量大于6mg 必須：A SDS-PAGE檢測(cè)圖，清楚標(biāo)示樣品上樣量，Marker上樣量，和各自的濃度。 最好：C WB檢測(cè)圖
可以
（1）多肽是否偶聯(lián)載體，偶聯(lián)載體多肽：總量大于6-7mg，純度大于80%；濃度大于0.5mg/ml；未偶聯(lián)載體多肽總量大于10mg，純度大于90%；濃度大于0.5mg/ml （2）必須提供如下信息：A SDS-PAGE檢測(cè)圖，清楚標(biāo)示樣品上樣量，Marker上樣量，和各自的濃度。
相關(guān)技術(shù)服務(wù)
相關(guān)資源
一、多克隆抗體的制備流程及注意事項(xiàng)
1、抗原選擇：選擇適當(dāng)?shù)目乖鳛槊庖咴?。確保抗原具有較高的純度和活性，并能夠激發(fā)免疫響應(yīng)。
2、免疫程序設(shè)計(jì)：確定免疫宿主動(dòng)物、免疫時(shí)間表和劑量計(jì)劃。根據(jù)抗原的免疫性質(zhì)，確定免疫的次數(shù)和間隔時(shí)間。注意選擇合適的免疫佐劑以增強(qiáng)免疫響應(yīng)。
3、抗原免疫：將抗原與免疫佐劑混合后注射到免疫宿主動(dòng)物體內(nèi)，通常是通過(guò)皮下注射或腹腔注射。確保注射過(guò)程無(wú)菌，并根據(jù)動(dòng)物的種類和重量調(diào)整注射劑量。
4、抗體檢測(cè)和篩選：收集免疫宿主動(dòng)物的血清樣本，通過(guò)檢測(cè)抗體的特異性和親和力來(lái)篩選出高親和力的抗體。注意選擇合適的檢測(cè)方法和控制實(shí)驗(yàn)條件，以確保篩選結(jié)果的準(zhǔn)確性。
5、細(xì)胞融合和篩選：將免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，生成雜交瘤細(xì)胞（hybridoma）。通過(guò)合適的篩選方法，如HAT選擇培養(yǎng)基，篩選出產(chǎn)生目標(biāo)抗體的雜交瘤細(xì)胞株。注意細(xì)胞融合和篩選過(guò)程的無(wú)菌操作，并確保細(xì)胞培養(yǎng)條件的穩(wěn)定性和適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)時(shí)間。
6、抗體生產(chǎn)和純化：將選定的雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，產(chǎn)生大量的抗體。隨后，通過(guò)抗體純化技術(shù)，如蛋白A/G親和層析、蛋白L層析或親和層析柱等方法，從細(xì)胞培養(yǎng)上清中純化抗體。注意選擇適當(dāng)?shù)募兓椒ㄒ源_?？贵w的純度和活性。
7、抗體驗(yàn)證：對(duì)制備的多克隆抗體進(jìn)行驗(yàn)證和鑒定，確保其特異性和親和力。驗(yàn)證的方法可以包括免疫組化、免疫印跡、流式細(xì)胞術(shù)等。注意使用適當(dāng)?shù)膶?duì)照實(shí)驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗(yàn)證，并進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)以驗(yàn)證結(jié)果的可靠性。
二、多克隆抗體的應(yīng)用及重要性
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應(yīng)用 |
描述 |
重要性 |
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免疫組化和免疫組織化學(xué) |
檢測(cè)和定位蛋白在組織或細(xì)胞中的表達(dá)和分布 | 觀察和研究蛋白的定位、表達(dá)水平和功能 |
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免疫印跡 |
檢測(cè)和定量蛋白的存在、表達(dá)水平和修飾 | 研究蛋白的功能和相互作用 |
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FC流式細(xì)胞術(shù) |
細(xì)胞表面標(biāo)記和細(xì)胞內(nèi)蛋白的檢測(cè) | 細(xì)胞類型鑒定和免疫表型分析 |
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免疫診斷 |
檢測(cè)感染性疾病、腫瘤標(biāo)志物和藥物測(cè)定 | 臨床診斷和疾病監(jiān)測(cè) |
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藥物研發(fā) |
藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)和驗(yàn)證 | 治療效果評(píng)估和新藥研發(fā) |
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研究蛋白結(jié)構(gòu)和功能 |
探索蛋白功能和相互作用 | 揭示蛋白的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能 |
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免疫療法 |
激活或抑制免疫系統(tǒng)的特定分子或細(xì)胞 | 癌癥治療和免疫調(diào)節(jié) |
