酵母雜交技術背景  

    由Fields和Song等人最初建立的主要為酵母雙雜交系統，它是一種研究真核生物細胞蛋白之間的相互作用的分子生物學技術，其后在此基礎上，又進一步開發了用于研究DNA與蛋白質之間相互作用的酵母單雜交，膜定位蛋白之間相互作用的膜酵母雙雜交以及RNA與配體之間相互作用的酵母三雜交等多項技術，為研究生物體內的功能作用機制提供了更加完善和嚴謹的研究手段。

  核酵母雙雜交技術原理  

    酵母轉錄因子Gal4包含DNA結合結構域（Gal4-BD）和轉錄激活域（Gal4-AD），誘餌（prey）與Gal4-BD融合，獵物（bait）蛋白與Gal4-AD融合，當誘餌蛋白和獵物蛋白發生相互作用時，Gal4-BD和Gal4-AD在空間上充分接近，可呈現完整的GAL4轉錄因子活性，啟動激活酵母菌株的報告基因AUR1-C、ADE2、HIS3和MEL1的轉錄，并以缺陷培養和顏色反應的結果得以呈現。

  應用方向  

核酵母雙雜交應用于轉錄因子調控化合物的生物合成途徑

轉錄因子NnWRKY70a和NnWRKY70b正向調節荷花中BIA生物合成[1]

核酵母雙雜交應用于病原體破壞宿主免疫系統功能機制研究

細菌F-box效應物通過介導水稻中OsTrxh2的蛋白酶體降解來抑制SAR免疫[2]

膜酵母雙雜交應用于脅迫環境下的抗性治療發現

通過篩選文庫得到相互作用蛋白為非肌球蛋白II型(Myo1p)功能研究提供新見解[3]

膜酵母雙雜交應用于蛋白新功能的發現

跨膜蛋白PRA1在早期分泌階段的功能研究方向[4]

  技術服務  

參考文獻：

[1] Li J, Li Y, Dang M, Li S, Chen S, Liu R,Zhang Z, Li G, Zhang M, Yang D, Yang M, Liu Y, Tian D and Deng X(2022) Jasmonate-Responsiv Transcription Factors NnWRKY70a and NnWRKY70b Positively RegulateBenzylisoquinoline Alkaloid Biosynthesis in Lotus (Nelumbo nucifera). Front. Plant Sci. 13:862915. doi: 10.3389/fpls.2022.862915.

[2] Hongtao Ji, et al. A bacterial F-box effector suppresses SAR immunity through mediating the proteasomal degradation of OsTrxh2 in rice Plant J. 2020 Nov;104(4):1054-1072.doi: 10.1111/tpj.14980. Epub 2020 Oct 14.

[3] Santiago, Ednalise; Akamine, Pearl; Snider, Jamie; Wong, Victoria; Jessulat, Matthew; Deineko, Viktor; Gagarinova, Alla; Aoki, Hiroyuki; Minic, Zoran; Phanse, Sadhna; San Antonio, Andrea; Cubano, Luis A; Rymond, Brian C.; Babu, Mohan; Stagljar, Igor; and Rodriguez-Medina, Jose R., "Novel Interactome ofSaccharomyces cerevisiae Myosin Type II Identified by a Modified Integrated Membrane Yeast Two-Hybrid (iMYTH) Screen" (2016). Biology Faculty Publications . 106.

[4] Ameair Abu Irqeba,Judith Mosinger Ogilvie(2019). Novel binding partners forPrenylated Rab Acceptor 1 identified by a split-ubiquitin yeast two-hybrid screen. https://doi.org/10.1186/s13104-019-4219-y.