實驗原理
螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)和海腎螢光素酶(Renila luciferase)可分別催化熒光素(luciferin)或腔腸素(coelenterazine)氧化形成oxyluciferin或coelenteramide,并在此過程中產生生物熒光。Double-Luciferase Reporter Assay Kit首先以熒光素為底物檢測螢火蟲熒光素酶報告基因的活性,之后在淬滅該熒光反應的同時,以腔腸素為底物檢測海腎熒光素酶報告基因的活性,具有檢測迅速、靈敏度高、檢測范圍廣、無細胞內源活性干擾等特點。
常見問題與解答
Q：試劑盒在使用過程中有哪些注意事項？
A：Luciferase Reaction Buffer Ⅱ在溶解過程中可能有部分沉淀析出，使?前應充分需蕩或將其置于37℃水浴鍋中，保證其完全溶解后再使用。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ反應前需平衡至室溫。
為保證實驗數據準確可靠，建議測量大量樣品時使用排槍添加Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ，使用過程中務必留意排槍各孔吸取的液體是否一致。
Luciferase Reaction Reagent和Luciferase Reaction Reagent Ⅱ均易發生氧化反應，請合理安排實驗，避免樣品解凍后在室溫下長時間放置。
