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DNA測序

DNA測序

  • 大規模測序
  • 快速穩定
  • PAGE純化

服務特色

金開瑞測序平臺應用ABI 3730XL測序平臺,可為您提供快速穩定的測序服務。

服務介紹

DNA測序是指對DNA分子的核苷酸序列進行分析和測定的過程。DNA測序技術已經廣泛應用于基因組學、生物學、醫學、農業、環境科學等領域,為研究人員提供了研究生物體結構和功能的重要手段。目前,第一代DNA測序技術的出現,使得測序速度和準確度得到了大幅提升,有望進一步推動生命科學領域的研究和發展。

服務優勢

  • 速度更快:PCR產物和質粒24h內發送測序結果,菌液樣本48h內發送測序結果;
  • 測序更專業:正常樣品有效測序長度可達800bp,測難度序列成功率高,品質有保障;
  • 服務更貼心:武漢三鎮駐點,隨時上門取樣,24h售前售后服務,及時解決您的任何問題;
  • 活動更豐富:不間斷推出各種驚喜活動,詳情請咨詢區域銷售經理。

服務流程

接受訂單及樣品
樣品處理
樣品鑒定
上機測序
序列分析
結果發送

客戶提供

測序信息單,測序樣品(包括菌液、質粒、PCR產物)和測序引物。


最終交付

  • 測序結果,包括1份ab1格式的圖譜文件和1份seq格式的序列文件

服務說明

服務內容

細分 服務周期
菌液測序/質粒測序/ PCR產物測序

<10反應

1-2工作日

≥10反應

1-2工作日

≥100反應

2-3工作日

大規模測序

2-3工作日
設計合成測序引物 合成量2ODPAGE 純化 1-2工作日

案例展示

常見問題與解析 (Q&A)

Q:DNA測序樣品用什么溶液溶解比較好?

溶解DNA測序樣品時,用滅菌蒸餾水溶解最好。DNA的測序反應也是Taq酶的聚合反應,需要一個最佳的酶反應條件。如果DNA用緩沖液溶解后,在進行測序反應時,DNA溶液中的緩沖液組份會影響測序反應的體系條件,造成Taq酶的聚合性能下降。 ??有很多客戶在溶解DNA測序樣品時使用TE Buffer。的確,TE Buffer能增加DNA樣品保存期間的穩定性,并且TE Buffer對DNA測序反應的影響也較小,但根據我們的經驗,我們還是推薦使用滅菌蒸餾水來溶解DNA測序樣品。

Q:提供DNA測序樣品時,提供何種形態的比較好?

我們推薦客戶提供菌體,由我們來提取質粒,這樣DNA樣品比較穩定。如果您可以提供DNA樣品,我們也很歡迎,但一定要注意樣品純度和數量。如果提供的DNA量不夠,我們就需要對質粒進行轉化,此時需收取轉化費。有些質粒提取法提取的DNA質量很好,象TaKaRa、Qiagen、Promega的質粒制備試劑盒等。 ??提供的測序樣品為PCR產物時,特別需要注意DNA的純度和數量。PCR產物必須進行切膠回收,否則無法得到良好的測序效果。 ??有關DNA測序樣品的詳細情況請嚴格參照"測序樣品的提供"部分的說明。

Q:DNA片段很長,一個反應讀不到頭,怎么辦?

如果DNA片段在載體上,可以用載體上兩端的引物同時測序,讓其中間交叉互補,便可完全測通。如果這樣還讀不通,可根據已經測出的序列設計測序引物作進一步測序(此稱為Primer Walking法),便可完全測通。

相關資源

1、高通量測序技術如新一代測序(Next-Generation Sequencing, NGS)已經日趨成熟,Sanger測序(一代測序)為什么沒有被完全取代?
    Sanger測序的準確性和可靠性使其成為這些特定應用領域的首選方法之一。盡管在大規模基因組測序中已經被新一代測序技術取代,但Sanger測序在需要高度準確性和可靠性的實驗中仍然發揮著重要作用。例如:

    ● 基因克隆:Sanger測序常用于基因克隆中的序列驗證。在構建基因工程載體或插入DNA片段時,需要確認目標序列的正確性和準確性。

    ● 突變檢測:Sanger測序可以用于檢測DNA序列中的點突變、插入缺失或重排等突變。它在研究遺傳性疾病、癌癥突變分析和個體基因組分析中具有重要作用。

    ● Sanger驗證:在新一代測序(NGS)等高通量測序技術中,由于其可能存在的錯誤率,Sanger測序通常被用作驗證方法。通過對特定區域進行Sanger測序,可以確認高通量測序結果的準確性。

 

2、Sanger測序(鏈終止法測序)和新一代測序技術對比介紹

分類

Sanger測序

新一代測序技術
原理

鏈終止法測序,通過合成鏈終止的核苷酸來確定DNA序列

并行測序原理,同時測序數百萬至數十億個片段
工作流程

DNA模板制備、引物設計、PCR擴增、測序、電泳分離、數據分析

DNA樣本制備、文庫構建、測序、數據分析
讀長

較長(通常800-1,000個堿基對),適用于較小的DNA片段

較短(通常數十到數百個堿基對),適用于整個基因組的測序
產出

相對較低,單個測序儀器產出數百到數千個片段

高,單次測序可產出數百萬至數十億個片段
成本

相對較高,包括設備、試劑和人力成本

相對較低,高通量平臺降低了測序成本
應用

適用于特定應用,如基因克隆、突變檢測、Sanger驗證等

適用于全基因組測序、轉錄組測序、表觀遺傳學等廣泛應用
優勢

可以得到較長的讀長,序列質量較高

高通量、高效率、適用于大規模測序和多樣本分析
局限性

產出量相對較低,不適用于大規模測序項目

讀長較短,可能存在測序錯誤和序列重疊的問題
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