修飾/標記引物
- 質量保證
- 快速交付
- 服務周到
服務特色
金開瑞具備強大的引物合成能力，可快速為您合成高質量普通引物；同時還可提供多種類的引物修飾、標記服務。
*您也可以下載“引物合成訂購表”并按照要求填寫發送郵件至oligo@genecreate.com
服務介紹
修飾/標記引物是指在普通引物的基礎上，通過添加特定的化學修飾或熒光標記來增強PCR反應的特異性和檢測靈敏度。常見的引物修飾形式包括有磷酸化、生物素、地高新、內部氨基修飾、5’氨基修飾、3’氨基修飾等，可用于各種非放射性免疫分析、雜交反應。這些修飾/標記可以使引物與目標DNA序列更緊密結合，增加PCR反應的特異性和選擇性，同時也可以使擴增產物在后續的檢測過程中更易于檢測和分析。修飾/標記引物廣泛應用于病原體檢測、基因型鑒定、基因表達分析等領域，為科學家們提供更精確、高靈敏度的分子生物學工具。
服務優勢
- 豐富的引物修飾/標記類型，大規模測序驗證平均突變率低于1/1000
- 嚴格執行ISO 9001和ISO 13485統一質控標準，產品過程可追溯性強，批次記錄完善
- 多種純化方式可供選擇，按需定制化各種規格、發貨形式和特殊引物合成
- 便捷完善的引物合成在線訂購系統，經驗豐富引物合成專家團隊和技術支持
服務流程
客戶提供
引物合成訂購表
需詳細填寫客戶信息、序列、堿基數、純化方式等信息
最終交付
- 對應合成量的標記/修飾引物凍干粉
- 引物操作說明書。
服務說明
| 修飾堿基 | ||
| 分類 | 修飾種類 | 純化方式 |
| 稀有堿基 | dI | PAGE |
| dU | PAGE | |
| 硫代修飾 | Phosphorthioate | PAGE |
| 磷酸基團 | 5'PO4 | HPLC |
| 氨基 | 5' NH2 C6 | HPLC |
| 3' NH2 C7 | HPLC | |
| 巰基 | 3' SH C6 | HPLC |
| 5' SH C6 | HPLC | |
| 生物素(Biotin) | 5' Biotin | HPLC |
| 3' Biotin | HPLC | |
| 熒光基團 (Fluorophores) | 5' Cy3 | HPLC |
| 5' Cy5 | HPLC | |
| 5' FAM | HPLC | |
| 3' FAM | HPLC | |
| 5' HEX | HPLC | |
| 5' TET | HPLC | |
| 5' Rox | HPLC | |
| 5' TAMRA | HPLC | |
| 3' TAMRA | HPLC | |
| 3' BHQ 1 | HPLC | |
| 3' BHQ 2 | HPLC | |
| 3`Dabcyl | HPLC | |
| 雙標 | 5' FAM-3' TAMRA | HPLC |
| 5' FAM-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' FAM-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' FAM-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5' HEX-3' TAMRA | HPLC | |
| 5' HEX-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' HEX-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' HEX-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5' TET-3' TAMRA | HPLC | |
| 5' TET-3' BHQ1 | HPLC | |
| 5' TET-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5' TET-3' Dabcyl | HPLC | |
| 5'Cy3-3' BHQ2 | HPLC | |
| 5'Cy5-3' BHQ2 | HPLC | |
| 其它 | 請咨詢 | |
案例展示
相關資源
1、 常見的引物修飾和標記的介紹及應用
|
修飾/標記類型 |
描述 | 應用領域 |
| 熒光標記引物 | 引物上連接熒光染料或熒光物質，用于可視化實驗 | 熒光PCR、原位雜交、熒光探針技術等 |
| 生物素標記引物 | 引物上連接生物素分子，用于親和素-雙親和素系統的富集或檢測 | 生物素-鏈酶擴增法（Biotin-ELISA）等 |
| 磷酸化引物 | 引物中引入磷酸化基團，增強與酶的結合能力 | PCR擴增、DNA測序等 |
| 逆轉錄引物 | 用于逆轉錄反應，將RNA轉錄成cDNA的引物 | RT-PCR、基因表達分析等 |
| 錨定引物 | 引物上引入錨定序列，用于PCR擴增后的測序特異性結合或適配體連接 | 測序、基因組拼接等 |
| 化學修飾引物 | 引物上引入化學修飾基團，如甲基化、磷酸化或其他修飾 | DNA甲基化分析、DNA交聯實驗、熒光共振能量轉移（FRET）等實驗 |
2、在修飾/標記引物合成過程中，常見的實驗難點及解決方案
①引物純度和質量控制：
● 使用高純度的試劑和原料。
● 選擇適當的合成方法和純化技術，如薄層凝膠電泳、高效液相色譜等。
● 進行質量控制檢測，如質譜分析、DNA濃度測量等。
②引物修飾效率和位置：
● 優化修飾反應條件，包括修飾試劑濃度、反應時間和溫度。
● 選擇合適的修飾化學反應或酶法。
● 進行修飾效率的評估和驗證。
③引物穩定性和儲存：
● 選擇穩定的修飾或標記化學基團。
● 存儲引物在適當的條件下，如低溫和干燥環境。
● 定期檢查引物的穩定性和活性。
④引物特異性和選擇性：
● 優化引物設計，包括序列選擇、引物長度和堿基組成。
● 使用引物設計軟件進行特異性分析和評估。
● 進行引物的特異性驗證實驗，如PCR擴增和測序分析。
⑤引物使用前的測試：
● 進行引物的特異性驗證實驗，如PCR擴增和測序分析。
● 進行引物的功能性驗證實驗，如結合實驗、放射性標記實驗等。
● 使用引物設計軟件進行理論分析和預測引物的性能。
3、在修飾/標記引物的設計和分析過程中，有哪些在線工具可以輔助研究人員進行操作和分析
● IDT OligoAnalyzer：由Integrated DNA Technologies (IDT) 提供的工具，用于評估引物的物理特性，如熔解溫度、GC含量和二級結構等。網址：idtdna.com/calc/analyzer
● Primer3：用于引物設計的廣泛使用的工具，可以根據指定的參數自動設計引物，如引物長度、熔解溫度范圍和目標序列要求等。網址：bioinfo.ut.ee/primer3-0.4.0/
● UCSC In-Silico PCR：通過在基因組數據庫中進行模擬PCR來評估引物的特異性，幫助確定引物是否會擴增非特異性產物。網址：genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr
● NCBI Primer-BLAST：由美國國家生物技術信息中心 (NCBI) 提供的工具，用于設計引物和評估其特異性，可以與NCBI數據庫進行比對分析。網址：ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/
● DNAWorks：用于設計引物和評估引物性能的工具，可以進行引物設計、優化和評估引物的特異性和穩定性。網址：helixweb.nih.gov/DNaworks/
● NEBuilder Assembly Tool：由New England Biolabs提供的在線工具，用于設計和優化DNA片段的引物，并進行引物的限制酶消化和連接設計。nebuilder.neb.com
