普通引物
- 次日交付
- 多種純化方式
- 工藝更穩(wěn)定
服務(wù)特色
金開瑞擁有目前主流的Dr.oligo192高通量引物合成儀、專業(yè)的技術(shù)人員及成熟的合成純化方法，可提供高質(zhì)量、多種類的引物合成服務(wù)。RPC、PAGE、HPLC等多種純化方式，保證質(zhì)量和及時(shí)的交貨時(shí)間，武漢地區(qū)次日即可交付。
服務(wù)介紹
普通引物是指在PCR反應(yīng)中作為引導(dǎo)DNA擴(kuò)增的引物，通常由18-25個(gè)堿基組成，可以與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，并提供DNA聚合酶催化合成新DNA鏈所需的3'端。普通引物通常用于常規(guī)PCR反應(yīng)中，包括基因表達(dá)分析、病原體檢測、基因型鑒定等應(yīng)用。普通引物的合成和設(shè)計(jì)非常常見和標(biāo)準(zhǔn)化，通?？梢栽谝飵熘姓业浆F(xiàn)成的引物，也可以根據(jù)需要定制合成，具有成本低、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。引物合成可用于PCR、測序、全基因合成、亞克隆、點(diǎn)突變、載體構(gòu)建、RNA干擾和基因重組等實(shí)驗(yàn)。根據(jù)不同的用途，可選擇不同的純化方式。
服務(wù)優(yōu)勢
- 先進(jìn)：采用世界上先進(jìn)的合成儀制造商BLP 公司生產(chǎn)的nm級別的Dr.oligo192高通量DNA合成儀，使引物合成更快速、更安全、更穩(wěn)定；
- 快速：3h內(nèi)可以合成192條30個(gè)堿基以內(nèi)的引物；常規(guī)RPC、DSL、OPC純化引物24h內(nèi)發(fā)貨，武漢地區(qū)次日即可交付；
- 安全：采用氣相氨解的原理，改進(jìn)的氨解方式，可以在90min內(nèi)使引物氨解的更快更完全，并且避免由于其他試劑氨解帶來的不必要的突變；
- 優(yōu)質(zhì)：多種純化方式，多重質(zhì)量檢測手段（HPLC、MS），全面保證我們發(fā)貨的質(zhì)量。
服務(wù)流程
客戶提供
引物合成訂購表：需詳細(xì)填寫客戶信息、序列、堿基數(shù)、純化方式等信息。
最終交付
- 對應(yīng)合成量的引物凍干粉；
- 引物操作說明書。
服務(wù)說明
| 純化方式 | 引物長度 | 產(chǎn)量(OD) | 發(fā)貨時(shí)間 |
| RPC純化 | 8-15nt |
1-2 |
1工作日 |
| 2-4 | 1工作日 | ||
| 15-59nt |
1-4 |
1工作日 | |
| 5-10 | 1工作日 | ||
| 10-15 | 1工作日 | ||
| 15-20 | 1工作日 | ||
| ＞20 | 1工作日 | ||
| 60-120nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 2-5 | 3工作日 | ||
| ＞5 | 3工作日 | ||
| PAGE純化 | 15-59nt |
1-2 |
3工作日 |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 60-80nt | 1-2 | 3工作日 | |
| 3-4 | 3工作日 | ||
| 5-8 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 80-100nt | 3 | 3工作日 | |
| 3 | 3工作日 | ||
| 3 | 3工作日 | ||
| ＞8 | 3工作日 | ||
| 100-120nt | 1 | 3工作日 | |
| 2 | 3工作日 | ||
| HPLC純化 | 8-15nt |
1-2 |
3-5工作日 |
| 3-4 | 3-5工作日 | ||
| 15-59nt | 1-4 | 3-5工作日 | |
| 5-8 | 3-5工作日 |
常見問題與解析 (Q&A)
兩條引物退火成功率達(dá)不到百分之百，里面會(huì)存在單鏈引物，引物退火后跑膠有雜鏈很正常，不能以此來判斷單鏈引物純度。
基因合成，尤其是難度基因和長片段基因，有可能造成延期，因此我們只能保證絕大多數(shù)基因按期交付。對于延期項(xiàng)目，我們的技術(shù)支持會(huì)給您及時(shí)匯報(bào)進(jìn)展。目前并沒有任何公司保證延期后減免費(fèi)用
相關(guān)資源
1、引物合成實(shí)驗(yàn)中的專屬名詞及解釋
● Oligo（Oligonucleotide）：Oligo是指短鏈的寡聚核苷酸，通常由20到200個(gè)堿基組成。在引物合成實(shí)驗(yàn)中，引物往往是一種特定長度的oligo。
● 反向合成（Reverse Synthesis）：在引物合成實(shí)驗(yàn)中，反向合成指從3'端到5'端逐個(gè)加入核苷酸單元，合成引物的過程。
● 脫保護(hù)（Deprotection）：在引物合成中，引物的核苷酸單元通常被保護(hù)基團(tuán)保護(hù)，以防止在反應(yīng)過程中發(fā)生意外的化學(xué)反應(yīng)。脫保護(hù)是指去除這些保護(hù)基團(tuán)的過程，使得引物的核苷酸單元可用于進(jìn)一步的化學(xué)反應(yīng)。
● HPLC（High-Performance Liquid Chromatography）：高效液相色譜法，一種常用的分離和純化技術(shù)，可用于分離和純化合成的引物。
● PAGE（Polyacrylamide Gel Electrophoresis）：聚丙烯酰胺凝膠電泳法，一種常用的DNA片段分析技術(shù)，可以用于評估引物的純度和大小。
2、引物的保存與使用注意事項(xiàng)
● 引物保存的注意事項(xiàng)：
? 儲(chǔ)存溫度：將引物儲(chǔ)存在干燥的條件下，通常在-20°C或更低的溫度下。避免頻繁的凍融循環(huán)，因?yàn)檫@可能導(dǎo)致引物的降解。
? 避光保護(hù)：引物應(yīng)儲(chǔ)存在避光的條件下，以防止光照引發(fā)的降解反應(yīng)。使用不透明的冷凍管或管盒來保護(hù)引物。
? 防潮防濕：確保引物儲(chǔ)存環(huán)境干燥，避免濕氣的進(jìn)入?？梢允褂酶稍飫┗蛎芊庑粤己玫膬?chǔ)存容器來防止?jié)駳馇秩搿?/p>
● 引物使用的注意事項(xiàng)：
? 引物質(zhì)量控制：在使用引物之前，進(jìn)行引物的質(zhì)量控制驗(yàn)證，如測序確認(rèn)引物序列的準(zhǔn)確性或質(zhì)譜分析驗(yàn)證純度。
? 合理稀釋：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，合理稀釋引物至適當(dāng)?shù)墓ぷ鳚舛?。確保稀釋過程中的準(zhǔn)確度和標(biāo)記清晰度。
? 正確溫度：在實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)引物的要求和擴(kuò)增反應(yīng)的最佳溫度，嚴(yán)格控制反應(yīng)溫度。避免超過引物的最大耐受溫度。
? 避免污染：使用無菌技術(shù)和無菌操作條件，避免引物受到外源性的污染。使用專用的無菌技術(shù)器材和操作區(qū)域。
? 單次使用：為避免引物的降解和污染，一次性使用所需量的引物，并避免重復(fù)凍融。
3、引物合成的實(shí)驗(yàn)舉例
● PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）：PCR是一種常用的基因擴(kuò)增技術(shù)，引物在PCR反應(yīng)中用于選擇性地?cái)U(kuò)增目標(biāo)DNA序列。
● 實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）：qPCR用于準(zhǔn)確測量目標(biāo)DNA或RNA的數(shù)量，引物在qPCR實(shí)驗(yàn)中用于擴(kuò)增目標(biāo)序列并進(jìn)行定量分析。
● DNA測序：引物在DNA測序中用于擴(kuò)增待測序列的片段，以便進(jìn)行測序反應(yīng)。
● RNA pull-down：RNA pull-down實(shí)驗(yàn)用于研究RNA與蛋白質(zhì)的相互作用。引物在該實(shí)驗(yàn)中用于捕獲目標(biāo)RNA分子，并與其結(jié)合的蛋白質(zhì)一起純化和分析。
● 基因突變分析：引物在基因突變分析中用于擴(kuò)增目標(biāo)基因的特定區(qū)域，以便進(jìn)行突變檢測和分析。
● 基因克?。阂镌诨蚩寺≈杏糜跀U(kuò)增目標(biāo)基因的特定區(qū)域，以便將其插入到表達(dá)載體或矢量中。
● 限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析：引物在RFLP分析中用于擴(kuò)增目標(biāo)基因的特定區(qū)域，以便進(jìn)行限制性酶切并分析不同基因型的片段長度差異。
4、用于引物合成設(shè)計(jì)、分析和操作的在線工具簡介
● Primer3 ：Primer3常用的在線引物設(shè)計(jì)工具，可以根據(jù)用戶提供的目標(biāo)序列信息，自動(dòng)設(shè)計(jì)適合的引物序列，并提供引物參數(shù)和特性分析。（primer3.ut.ee）
● IDT SciTools ：IDT SciTools提供了多個(gè)在線工具，包括引物設(shè)計(jì)、引物分析、序列優(yōu)化和酶切位點(diǎn)分析等。其中包括了引物設(shè)計(jì)、Tm值計(jì)算、二聚體結(jié)構(gòu)預(yù)測等功能。（idtdna.com/pages/tools）
● OligoAnalyzer：OligoAnalyzer是IDT提供的在線工具，用于分析引物的理化特性，包括Tm值、二聚體結(jié)構(gòu)、GC含量、末端穩(wěn)定性等。（idtdna.com/pages/tools/oligoanalyzer）
● NCBI Primer-BLAST：NCBI Primer-BLAST是由國家生物技術(shù)信息中心（NCBI）提供的在線工具，用于引物設(shè)計(jì)和特異性分析。它可以設(shè)計(jì)引物，并對其在基因組中的特異性進(jìn)行評估。（ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/）
● UCSC In-Silico PCR：UCSC In-Silico PCR是UCSC基因組瀏覽器提供的在線工具，可以通過輸入引物序列，在基因組上進(jìn)行虛擬PCR，并可視化PCR產(chǎn)物的位置。（genome.ucsc.edu/cgi-bin/hgPcr）
● SnapGene：SnapGene是一款商業(yè)軟件，提供了在線版本和桌面版本。它可以用于引物設(shè)計(jì)、序列編輯、限制性酶切模擬和克隆操作等。在線版本允許用戶進(jìn)行一些基本的引物設(shè)計(jì)和序列分析操作。（snapgene.com）
