一起科研走花路,探索你不知道的酵母雜交篩選小技巧
一、 參與的男女嘉賓必須衣冠整齊,活力四射,雙方到底是要見面的,最明顯的就是會先打扮一下自己。那么酵母的相親也不例外,優質的文庫可供選擇,誘餌的轉化效率以及活力都要保持在一個較高的水平,茫茫蛋白,一眼望去-yeah excellent men!
二、 沉默就是破銅爛鐵,陌生人第一次見面,想要相親成功,溝通極其重要。如果不制造共同話題那必然是黯然退場。同理那酵母的相親也一樣,要么提高共轉效率,要么控制好誘餌和文庫的比例,增加相互碰撞的幾率,速率不能過快,要給兩個蛋白充分的時間結合產生相互作用,這樣才能提高來電概率。
三、 感情除了有一見鐘情,還有日久生情。所以雜交的篩選時間上也會有不同,可以根據具體誘餌具體控制分析,作用強弱可根據信號強弱進行判斷,畢竟與誘餌匹配的另一半適合的有很多,信號最強的就是能使之怦然心動的另一位。
言歸正傳,文庫構建篩選的流程通常如下所示:
1. 核酵母文庫構建篩選實驗流程
建庫
雙雜篩選
01
matting方式
02
共轉
單雜篩選
2. 膜酵母文庫構建篩選實驗流程
建庫
共轉
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