蛋白質(zhì)-核酸互作研究
信息來源:金開瑞 作者:genecreate 發(fā)布時間:2017-06-15 17:05:30
蛋白質(zhì)和核酸是組成生命的主要生物大分子,研究蛋白質(zhì)和核酸的相互作用、蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的相互作用是后基因組時代重要的研究領(lǐng)域之一。 金開瑞依托六大核心技術(shù)平臺,提供多種方法的蛋白質(zhì)和核酸、蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)相互作用研究技術(shù)服務,幫助您理清轉(zhuǎn)錄調(diào)控過程,發(fā)現(xiàn)互作蛋白,加速研究進程。
凝膠遷移或電泳遷移率檢測(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一種檢測蛋白質(zhì)和DNA序列相互結(jié)合的技術(shù),可用于定性和定量分析;目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是轉(zhuǎn)錄因子研究的經(jīng)典方法。
金開瑞提供EMSA檢測技術(shù)服務,幫助您檢測DNA結(jié)合蛋白、RNA結(jié)合蛋白、特定的蛋白質(zhì),并可進行未知蛋白的鑒定。
染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)是將樣品中同抗體靶蛋白相互作用的DNA隨免疫復合物沉淀,是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的有力工具,利用該技術(shù)不僅可以檢測體內(nèi)反式因子與DNA的動態(tài)作用,還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾以及轉(zhuǎn)錄因子與基因表達的關(guān)系。
蛋白質(zhì)與RNA的相互作用是許多細胞功能的核心,如蛋白質(zhì)合成、mRNA組裝、病毒復制、細胞發(fā)育調(diào)控等。RNA Pull Down使用體外轉(zhuǎn)錄法標記生物素RNA探針,然后與胞漿蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白質(zhì)復合物。該復合物可與鏈霉親和素標記的磁珠結(jié)合,從而與孵育液中的其他成分分離。復合物洗脫后,通過western blot實驗檢測特定的RNA結(jié)合蛋白是否與RNA相互作用。
金開瑞現(xiàn)提供RNA pull down/ DNA Pull Down檢測技術(shù)服務, 使用特異性二抗進行檢測,能有效避免抗體重鏈對結(jié)果的信號干擾。并且金開瑞配套有世界上最先進的質(zhì)譜儀,能顯著提升檢測效果。
四、熒光素酶報告基因
雙報告基因用于實驗系統(tǒng)中作相關(guān)的或成比例的檢測,通常一個報告基因作為內(nèi)對照,使另一個報告基因的檢測均一化。理想的雙報告基因方法應該使用戶能夠以螢火蟲熒光素酶所具有的速度,靈敏和線性范圍對同一樣品中的兩個報告基因同時測定。
金開瑞應用Promega 公司的雙熒光素酶報告基因檢測(DLR)系統(tǒng),提供DLR檢測服務。
五、酵母單雜交
酵母單雜交技術(shù)最由酵母雙雜交技術(shù)發(fā)展而來的,通過對報告基因的表型檢測,分析DNA與蛋白之間的相互作用,以研究真核細胞內(nèi)的基因表達調(diào)控。由于酵母單雜交方法檢測特定轉(zhuǎn)錄因子與順式作用元件專一性相互作用的敏感性和可靠性,現(xiàn)已被廣泛用于克隆細胞中含量微弱的、用生化手段難以純化的特定轉(zhuǎn)錄因子。
金開瑞提供酵母單/雙雜交技術(shù)服務,助力您的蛋白質(zhì)-核酸互作研究。
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