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金開瑞生物帶你深入了解膠體金試紙條

信息來源：金開瑞作者：genecreate 發(fā)布時間：2017-10-09 15:57:58

1971年Faulk和Taylor首先將膠體金應(yīng)用于免疫細胞化學研究，1974年Romano建立了間接免疫金染色法，從此膠體金作為新型的免疫標記技術(shù)得到迅速發(fā)展。

由膠體金標記技術(shù)發(fā)展起來的膠體金免疫快速診斷技術(shù)主要有兩種：快速斑點免疫金滲濾法和膠體金免疫層析法。后者具有操作簡便（浸入液體中就行）、快速（全程5~10分鐘搞定）、無需儀器設(shè)備（結(jié)果目測就OK）、試劑穩(wěn)定、成品易于保存（保質(zhì)期1~2年）等優(yōu)點，是科學研究和臨床診斷的有力工具。

膠體金（colloidal gold）即膠體狀態(tài)的金單質(zhì)，因為其單質(zhì)粒徑非常小可以分散于溶液中形成膠體，故名膠體金。膠體金的常規(guī)制備方法是用還原劑還原氯金酸（HAuCl4，橘黃色晶體，易潮解，氯金酸合成見下圖）里的金元素形成金膠體顆粒。這種膠體顆粒在堿性環(huán)境下帶上負電荷，可與蛋白質(zhì)的正電荷基團牢固結(jié)合，對蛋白進行標記，用于后續(xù)的檢測，如制成膠體金試紙條（卡）進行物質(zhì)的檢測。

還原氯金酸的化合物很多，通常我們選擇檸檬酸三鈉（Na3C6H5O7•2H2O）。當用1%檸檬酸三鈉還原100 mL 0.01%金氯酸時，不同體積比可以得到不同粒徑和顏色的膠體金哦！

制備膠體金步驟簡單（見下圖），重點是制備過程所用到的材料都必須是徹底清潔的。例如水至少是雙蒸水，玻璃棒、玻璃容器等要酸洗后沖洗干凈并且最好是硅化的，制備好的膠體金可以加入0.02％ NaN3在潔凈玻璃容器內(nèi)長期存放。

適合于膠體金試紙條（卡）的膠體金粒徑在20~40 nm之間為宜，制備的膠體金溶液呈紅色，膠體金被置于試紙條（卡）的樣品墊下游。當液體樣品滴加后，液體溶解膠體金并帶動其與樣品中的抗原（抗體），在硝酸纖維素膜的毛細作用下從一端慢慢滲移到吸收墊一端，利用抗體/抗原特異性結(jié)合及膠休金的顯色（紅色）反應(yīng)，可以檢測抗原／抗體存在與否。

膠體金試紙條（卡）主要分為雙抗夾心法和競爭法兩類，前者適合檢測大分子物質(zhì)，后者適合檢測小分子物質(zhì)。兩種試紙條（卡）的原理見下圖：