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第②課開講啦| 看直播,找答案,打通蛋白研究任督二脈!

信息來(lái)源:金開瑞 作者:genecreate 發(fā)布時(shí)間:2020-05-11 09:57:10

01、講座時(shí)間
2020年5月13日19:30-20:30
02、講座主題
蛋白質(zhì)組學(xué)和單抗技術(shù)在農(nóng)學(xué)課題中的綜合運(yùn)用策略
03、講師簡(jiǎn)介
 

詹雷雷
浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院博士、博士后
        研究成果接連刊登在Nature Structural & Molecular Biology、RNA Biology、Nature Communications Heredity、Genome、 Trends Evolutionary Biology等雜志 上;研究期間獲得國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目一項(xiàng),國(guó)家博士后基金兩項(xiàng),浙江省博士后擇優(yōu)資助項(xiàng)目一項(xiàng)。
       目前擔(dān)任我司研發(fā)部學(xué)術(shù)PI ,主責(zé)多個(gè)科研合作項(xiàng)目,已協(xié)助客戶發(fā)表論文數(shù)十篇,另有多篇文章在審稿和修回中。
 
04、報(bào)名方式
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答疑時(shí)間
學(xué)生疑問:膠體金穩(wěn)定性一直不太好,放一段時(shí)間靈敏度就會(huì)降低或者升高,怎么調(diào)整?
講師解答:如果原料各方面沒有問題的前提下,結(jié)果不穩(wěn)定,比較常見的原因有這兩個(gè):樣本前理不當(dāng);成品未放置在干燥的環(huán)境下保存。
 
學(xué)生疑問:呼吸道病原微生物膠體金檢測(cè)的假陰性如何避免或者降低?
講師解答:一般情況下,假陰性主要是原料靈敏度不夠?qū)е?,所以在開發(fā)成品之前,除了確??贵w的特異性外,還應(yīng)大致了解自己的樣本待檢測(cè)范圍。
 
學(xué)生疑問:蛋白表達(dá)在包涵體和上清對(duì)抗體制備的影響
講師解答:抗原在是否能制備高親和力抗體的過(guò)程中占據(jù)非常重要的位置,俗話說(shuō),抗原制備好了,抗體也就成功了一半,那么什么才叫好的抗原,最簡(jiǎn)單的理解,即蛋白結(jié)構(gòu)及修飾越接近天然蛋白,蛋白質(zhì)量就越好,所以大多數(shù)客戶都更傾向于制備的免疫原能是上清表達(dá)的蛋白,但是做過(guò)大腸系統(tǒng)表達(dá)的都知道,只有30%-40%左右的蛋白能實(shí)現(xiàn)上清表達(dá),所以這個(gè)時(shí)候抗體的篩選方案就非常重要了,當(dāng)然如果制備的抗體只是做WB等基礎(chǔ)的科研實(shí)驗(yàn),包涵體也是可以用的,畢竟它的一級(jí)結(jié)構(gòu)是沒有問題的。
 
學(xué)生疑問:選擇蛋白的全長(zhǎng)或哪個(gè)區(qū)段制備抗體,最靠譜的依據(jù)是什么呢?
講師解答:對(duì)于抗原的區(qū)間選擇,沒有金標(biāo)準(zhǔn),不然也就不會(huì)有那么多失敗的抗體案例了,通常情況下,對(duì)蛋白的全長(zhǎng)進(jìn)行一系列分析,比如抗原指數(shù)得分,比如親疏水性,再比如保守區(qū)等一系列結(jié)構(gòu)域分析,以及表達(dá)情況預(yù)測(cè)等等,然后再結(jié)合后期對(duì)抗體的應(yīng)用需求,預(yù)算等等因素,綜合選擇合適的表達(dá)區(qū)間,合適的表達(dá)系統(tǒng)。
 



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